侧柏叶为柏科植物侧柏Platycladus orientals(L.)Franco的干燥枝梢及叶。其苦、涩、寒、归肺、肝、脾经,具有凉血止血、化痰止咳、生发乌发之功效,用于吐血、衄血、咯血、便血、崩漏下血、肺热咳嗽、血热脱发、须发早白 [1]。侧柏叶中的主要成分是挥发油、黄酮、鞣质等,其中黄酮类化合物为其主要成分,其防脱药理作用主要在于激活毛母细胞核促进血液循环,使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用[2]。侧柏叶中的总黄酮成分以槲皮苷为主,中国药典2010年版中以槲皮苷作为品质评价指标成分[3]。本实验主要进行HPLC方法学考察,通过HPLC法对侧柏叶及中药洗发水进行侧柏叶槲皮苷的含量测定。
1 实验部分
1.1 仪器
日本日立L-2000 高效液相色谱仪,配四元梯度泵、自动进样器和L-2420UV检测器; KQ128型超声仪(昆山超声仪器有限公司); FA2004电子天平(上海舜玉恒平科技仪器有限公司)。
1.2 试剂
侧柏叶槲皮苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:111538-200403),甲醇(SINENCE.INC,批号:120112912)为色谱纯,其余试剂为分析纯。
1.3洗发水的制备
1.3.1基础配方
基础配方组成(w/%)为:AESNa(月桂醇聚醚硫酸酯钠,w=70%)15、侧柏叶提取液10、烷基糖苷(C12-18烷基葡糖苷)2.25、K12A-25(月桂醇硫酸酯铵,w=25%)20、CAB(椰油酰胺丙基甜菜碱,w=32%)3.5、EDTA-2Na(EDTA二钠)0.1、CMEA(椰油酰胺MEA)1.25、氯化钠 0.5、瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵0.35、JR-400(聚季铵盐-10)0.15、柠檬酸0.05、硅油1.75、泛醇0.3、防腐剂0.1、香精0.15、蒸馏水余量。
1.3.2配制工艺
1.取适量蒸馏水加热至85℃,加入瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵,分散搅拌均匀后,加入柠檬酸水溶液,高速(45HZ)搅拌至完全均匀。加入CAB搅拌均匀;
2.依次抽入EDTA-2Na 、AESNa、烷基糖苷、K12A-25、CMEA,高速搅拌10分钟;将JR-400用适量水分散后加入,高速搅拌20分钟;
4.降温至40℃后。依次加入硅油、泛醇、防腐剂、香精、色素和侧柏叶提取液,搅拌20~30分钟
5.用氯化钠调节黏度至1.2~1.8 Pa.s ,取样检测,合格后待用。
2 实验条件
2.1 色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(150 ×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-冰醋酸=40:60:1.5; 检测波长:254nm;流速:1.0ml/min;柱温为25℃;进样量:10μl。在此色谱条件下,测定结果见图1、图2、图3,图4,结果显示系统适应性良好。