[摘要] 目的：了解和掌握陕西省汉中市食品中食源性致病菌的污染状况，防止食源性疾病的发生，提高对食源性疾病的预警和控制能力。方法：2016年在全市4个监测点采样并检测五大类，共计281份。选取3家养鱼场、4家超市、3家农贸市场的样品进行了沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、蜡样芽胞杆菌、弯曲菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌的定性检测。结果：共检出致病菌83株，总阳性检出率29.54%。其中致病菌检出率依次为弯曲菌（74.29%），蜡样芽胞杆菌（46.67%），金黄色葡萄球菌（16.67%），沙门氏菌（11.2%），大肠埃希氏菌（10%），单核细胞增生李斯特菌（6.67%），霍乱弧菌（非致病性）（2.56%），创伤弧菌（0.64%）；其他致病菌均为检出；结论：汉中市食品中存在不同程度的食源性致病菌污染，必须采取针对性措施加强食品安全工作，切实有效的预防和控制食源性疾病的发生；嗜盐性弧菌从内陆淡水动物性水产品养殖环节检出，可能对食物链产生的影响值得关注。
食品安全是一个全球性的重大的公共卫生问题，随着经济全球化进程的加快，已经越来越受到人们的关注，据资料[1]显示，微生物是引起食源性疾病的主要原因，占46.4%。为掌握陕西省汉中市特定食品或特定污染物的水平，确定危害因素分布和可能来源，及时发现食品安全隐患，2016年对该地的五类食品281份样品进行监测，结果分析如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 试剂和干粉培养基购自北京陆桥技术有限公司，科玛嘉显色平板和哥伦比亚血平板购自郑州博赛生物技术研究所；五种致泻大肠埃希氏菌检测试剂盒（上海之江生物科技股份有限公司）；天隆TL988荧光定量PCR仪；VITEK2全自动微生物生化鉴定系统（VITEK 2 Compact，法国生物梅里埃公司）GN TEST革兰氏阴性杆菌鉴定卡购自北京威泰克生物技术有限公司
1.2 样品的种类和来源 2016年全年采集281份样品。包括散装熟肉制品30份，生禽肉35份，生畜肉30份，地方特色食品（面皮）30份，淡水动物兴水产品养殖环节中常见弧菌专项监测156份，分别在汉中市南郑县、西乡县、城固县、汉台区各大农贸市场、超市、淡水养殖鱼塘采集。
1.3 检测项目 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、蜡样芽胞杆菌、弯曲菌、副溶血弧菌（包括毒力基因）、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌
1.4 方法
1.4.1沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌检验 按照国家食源性致病菌监测工作手册要求以及2016年淡水动物兴水产品养殖环节中常见弧菌专项监测工作手册的检验方法。样品按相应检测项目分别接种缓冲蛋白胨水、10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤、LB1/LB2增菌液、改良EC肉汤、生理盐水、3%氯化钠蛋白胨水、改良磷酸盐缓冲液增菌后，再划线接种相应细菌的选择性分离平板，筛选出可疑致病菌后，大肠埃希氏菌使用五种致泻大肠埃希氏菌荧光PCR试剂盒对可疑菌落分型鉴定，然后经生化鉴定系统及血清学进一步鉴定到种、群或血清型。
1.4.2弯曲菌（空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、海鸥弯曲菌、乌普萨拉弯曲菌、胎儿弯曲菌胚胎亚种）检验 无菌操作条件下加入缓冲蛋白胨水后(加入500ml/kg),反复揉搓鸡胴体5min。取鸡揉搓液加入分别带有0.45μm孔径滤纸的mCCDA平板和Skirrow血平板上，于微需氧环境42℃培养24-48h，用接种针挑取可疑菌落接种于哥伦比亚血平板上，于42℃微需氧环境中培养24-48h后，用全自动微生物生化鉴定系统
和相关分型的生化实验对可疑菌落进行鉴定。
2 结果
2.1 各类食品中食源性致病菌检出情况 2016年汉中市检测生禽肉、生畜肉、地方特色食品、散装熟肉、淡水动物性水产品养殖环节中常见弧菌专项五大类，共计281份，检出食源性致病菌83株，总阳性检出率29.54%。其中检出弯曲菌26株，检出率74.29%；检出蜡样芽胞杆菌14株，检出率46.67%；检出金黄色葡萄球菌15株，检出率16.67%；沙门氏菌14株，检出率11.2%；检出单核细胞增生李斯特菌6株，检出率6.67%；检出大肠埃希氏菌3株，检出率10%;检出霍乱弧菌4株（非致病性），检出率2.56%；检出创伤弧菌1株，检出率0.64%；其他致病菌均为检出；
2.2 食源性致病菌在各类食品中的分布情况 弯曲菌主要在生禽肉中检出，检出率74.29%共检出，共两种常见致病性弯曲菌，其中空肠弯曲菌占比80.77%（21/26），结肠弯曲菌占比19.23%；沙门氏菌主要是从生禽肉、生畜肉和散装熟肉制品中检出，检出率分别是31.4%、0.67%、3.33%；蜡样芽胞杆菌主要从地方特色食品中检出，检出率为46.67%；金黄色葡萄菌主要从生畜肉和地方特色食品，检出率分别是40%和10%；单核细胞增生李斯特菌主要从生畜肉和散装熟肉制品中检出，检出率13%和6.67%；霍乱弧菌和创伤弧菌主要从淡水动物兴水产品养殖环节中常见弧菌专项中检出，检出率是2.56%和0.64%；大肠埃希氏菌主要从生畜肉检出，检出率是10%，检出的都是典型致病性大肠杆菌。
作者姓名：陈雅丽，张志强*，刘红丽，高洁，张木林, 李芃芃
