（摘要）目的 探讨Aβ25-35诱导星形胶质细胞增殖的合适浓度，并研究星形胶质细胞的体外培养。方法 培养第3代的大鼠星形胶质细胞，分为10组，各组分别加入0、5、10、20、30、40、50、60、70、100 、200（μmol/L）的Aβ25-35培养24 h后，各组分别加入噻唑蓝，培养4 h后，计算各组的细胞增殖率。结果 Aβ25-35浓度为5～60 μmol/L时，星形胶质细胞的增值率明显高于0 μmol/L组（P<0.05），当Aβ25-35浓度为100 μmol/L、200 μmol/L浓度时，星形胶质细胞的增值率明显低于0 μmol/L组（P<0.05）。结论 Aβ25-3在5～60 μmol/L浓度范围内可以促进星形胶质细胞增殖，可用于阿尔茨海默病的毒性机制研究。
（关键词）阿尔茨海默病；β-淀粉样蛋白；星形胶质细胞
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是中枢退行性疾病，β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein，Aβ）聚集沉积成老年斑是AD的病理特征[1]，在AD病人大脑病理切片中发现明显的星形胶质细胞(astrocyte，AS)增生，尤其是围绕受损的神经元周围有强的AS反应。
AS具有对各种损害产生强烈反应的特性，与神经元细胞相互作用，维持神经系统内环境的稳定，AS在AD的病理过程中呈现出清除Aβ的作用[2]，但随着病程进展，Aβ能够诱导AS增殖，产生致炎因子，导致神经元细胞损伤[3]，因此建立良好的AS培养模型对研究AD有着重要作用，本研究探讨Aβ25-35诱导AS增殖的合适浓度，并研究AS的体外培养。为研究药物对AD的治疗作用提供细胞模型的实验依据。
1实验材料
1.1实验动物 新生1 d内的SPF 级SD大鼠，体重为5～6 g，为南方医科大学实验动物中心提供（合格证号：scxk粤2006-0015）
1.2主要仪器 CO2细胞培养箱，Eppenddorf公司；常温台离心机，Themo公司；超净台，阿尔泰实验室设备有限公司；流式细胞仪。R & D公司；荧光倒置显微镜，OLYMPUS公司；多功能酶标仪，Molecular Devices公司。
1.3主要试剂 Aβ25-35、噻唑蓝，sigma公司，DMEM培养基、胎牛血清，Hyclone公司，PBS、0.25% 胰蛋白酶-DETA，吉诺生物医药科技有限公司，兔抗GFAP多抗，Santa Cruz公司，FTTC标记的羊抗兔IgG，北京博奥森生物技术有限公司，青霉素-链霉素溶液，Gibco公司，SDS，广州威佳科技有限公司。
1.4 Aβ25-35（1mmo/L）储存液、噻唑蓝溶液（MTT）、三联溶解液配制 5 mg Aβ25-35加入4.72 ml超纯水中，250 mg MTT加入50 ml PBS溶液中，至其完全溶解，另外，10 g SDS、5 ml异丁醇和0.1 ml HCL（1 mmo/L），用双氯水定容为100 ml，用0.22μm滤膜过滤除菌后分装，Aβ25-35、MTT－20 ℃保存，三联溶解液4℃保存。
作者：黄秀芳