摘要：目的 研究心血管抗心绞痛药硝苯地平类药物对肝癌细胞的影响。方法 在培养肝癌细胞系HepG2的培养液内加入10-20µg/ml的硝苯地平药物，分别采用western blotting，RT-PCR及流式等实验来检测该药物对肝癌细胞的影响。结果 在培养液内加入终浓度为20µg/ml药物时，细胞内的蛋白水平明显升高。作为肝功能指标的蛋白如碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）等明显高于对照组。RT-PCR的结果表明此蛋白的mRNA水平在加入药物之后明显升高。流式结果也证明了在加入药物之后，该药物对肝癌细胞周期方面的影响，肝癌细胞在加药之后G2期比例增加。结论 硝苯地平类药物抑制HepG2的生长，为临床用药提供依据。
关键词：硝苯地平类药物、肝癌细胞、肝功能指标、细胞周期
心、脑血管疾病是国内外最常见的两种严重疾病[1]。经调查统计，中国心血管病患病率处于上升阶段，并且因心血管引发死亡率的比例占首位。因此，心血管病的治疗与预防已是目前亟需解决的问题。目前用于治疗心血管系统的药物有抗心绞痛、抗心律失常、抗高血压等几类。而各类型药物又根据药物不同性质或不同作用机制分为几种药物来行使相同的功能。如抗心功能不全的药由强心甙及非甙类正性肌力作用药，受体激动剂等组成。在临床使用药物时，我们可根据情况需要同时使用几种药物来达到更好的效果。此时，我们就应该需要了解不同药物的作用机制，作用方式，注意事项及其可能带来的负面效应。
硝苯地平类药物是抗心绞痛药中的一类。硝苯地平，二氢吡啶类钙拮抗剂，可选择性抑制钙离子在心肌细胞及平滑肌细胞内的转运[2-4]。此药是心血管系统药的一种，是在临床上主要用于高血压和冠心病的治疗[5]。最新研究表明，硝苯地平临床应用日趋广泛，存在多种药理作用[6]。FUKUO等指明硝苯地平可通过抑制内皮细胞凋亡以及血管炎症反应，从而抑制动脉粥样硬化的发展[7]。也有研究表明硝苯地平可减少大鼠主动脉血管平滑肌炎症蛋白的表达[8]。通常情况下，药物在机体吸收以后，经肝脏内转化代谢，最终经肾排泄出去。药物在机体内的代谢途径大都是从肝脏中代谢，因此我们会考虑该药是否会对肝脏造成损伤。所以，我们通过研究此药是否对肝癌细胞系HepG2造成影响及其中的作用机制，从而为临床用药提供证据。
材料与方法
1.材料
1. 试剂 肝癌细胞系HepG2购自于美国America type culture collection (ATCC)；RPIM-1640及胎牛血清（Fetal bovine serum, FBS）均购自于Gibco; 碱性磷酸酶，乳酸脱氢酶购自Santa Cruz；Western blotting所用试剂均购自国外进口，如tris 购自Promega 公司，曝光所用发光液购自Santa Cruz；cDNA反转录试剂盒购自invitrogen；引物合成由sigma公司合成；培养皿来自Corning；硝苯地平类药来自于新乡第一附属医院药房。
作者：王新启