[摘要]:目的:探讨从外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)或复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者分离的白色念珠菌菌株的生物膜形成率和抗真菌剂敏感性。方法:收集165例白色念珠菌菌株,体外诱导多微生物生物膜以评估白色念珠菌与RVVC中的细菌种类之间的关联,体外实验数据用小鼠模型验证。结果:从RVVC患者分离的菌株显示出更高的生物膜形成速率和更强的抗真菌剂抗性。一旦与细菌共同培养,多微生物生物膜表现出比单一白色念珠菌生物膜更快的生长速度。使用小鼠模型,发现从注射混合微生物悬浮液的小鼠分离的阴道样品中的生物膜形成速率显著高于白色念珠菌悬浮液。结论:从RVVC分离的白色念珠菌菌株的高生物膜形成速率和强抗真菌剂抗性以及多微生物生物膜的形成将增强白色念珠菌对阴道的损伤。
[关键词]:抗真菌药物,白念珠菌,多微生物生物膜,复发性外阴阴道念珠菌病
Analysis of drug resistance of biofilm and recurrent vulvovaginal candidiasis
Ying Furong1, Zhu hua1, Ma Jun1,Zhao Zhi chao2, Lv Jiayu2,Lin Chao1,Zhou Wu1,Shi Liang1
(1.The Firs t Affiliated Hospital,Wenzhou Medical University,Wenzhou,Zhejiang,325000)
(2.Wenzhou Medical University,Wenzhou,Zhejiang,325000)
[ABSTRACT] Objective:To investigate the biofilmformation rate and antifungal sensitivity of C. albican isolates isolatedfrom vulvovaginal candidiasis (VVC) or recurrent vulvovaginal candidiasis (RVVC) patients. Methods:The 165 C. albican strains were collected to induce in vitro microbial biofilms to assess the association between C. albican strains and bacterial species in RVVC. In vitro experimental data were validated with rat models. Results:Strains isolated from RVVC patients showed higher biofilm formation rates and stronger antifungal resistance.Once incubated with bacteria, the microbial biofilm showed a stronger growth rate than the single C. albican biofilm. Using the rat model, it was found that the number of colonies in the vaginal samples isolated from rats injected with mixed microbial suspensions was significantly higher than the numberof colonies with C. albicansuspensions.Conclusion The high biofilm formation rate and strong antifungal resistance of the C. albican strain isolated from RVVC and the formation of microbial biofilm will enhance the damage of C. albican to the vagina.
[Keywords]:antifungal,Candida albicans, microbial biofilm,recurrent vulvovaginal candidiasis
基金项目:国家自然青年科学基金(81501823),浙江医药卫生科技计划(2017KY459),温州市公益类科技计划(Y20160071,Y20160071),浙江省自然科学基金(LY17H200005)
作者简介:应芙蓉(1985-12),女,医学学士,技师,从事微生物与分子生物学研究
通讯作者:石亮(1981-9),男,医学博士,副主任医师,从事生化与分子生物学研究
外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)影响超过75%的女性,主要是在其生育年龄[1]。一般来说,外阴阴道炎的特征在于阴道腔和外阴的感染,其症状包括灼痛、瘙痒、酸痛、异常排尿和性交疼痛[2]。在VVC受损的人中,5-10%的患者发生的急性VVC发作为复发性VVC(RVVC)[3]。据报道,虽然有几种念珠菌种参与了VVC和RVVC的发病[4],但是在各种报道中,白色念珠菌被证明是阴道炎的主要病因,流行率为70-90%,并表现出允许定居的机制或主体感染[5]。近年来,随着唑类药物的广泛应用,RVVC发病率增加,疾病治愈更加困难。鉴于多微生物生物膜对微生物耐药性的关键作用,本实验对我院165例RVVC患者分离的白色念珠菌的抗真菌药物耐药性进行了评估。通过一系列体外和体内实验检测了白色念珠菌菌株生物膜形成潜力以及抗真菌剂抗性。目前的研究不仅仅是对来自不同地区各家医院RVVC的微生物组成的补充,而且也为抗生素在VVC或RVVC治疗中的应用提供参考。
1.材料和方法
1.1患者和样本收集
收集温州医科大学第一附属医院2015年9月至2016年9月期间女性VVC患者165例。涉及的患者应符合以下标准:1)有关临床病理学和预后特征的详细信息 2)确诊为含有孢子或假丝酵母菌的阴道分泌物且被诊断为VVC。 3)VVC每年感染四次以上的患者被诊断为RVVC。一年以前接受过抗真菌药物治疗的患者被排除在研究之外。所有患者的阴道分泌物由高级临床医生从后阴道穹窿或阴道壁收集,并保存以便随后分离白色念珠菌。分离白色念珠菌后,对常规的VVC治疗患者进行随访,根据VVC的复发确定随访时间。