klotho是一种抗衰老蛋白,分为膜型和分泌型,膜型klotho主要是作为纤维母细胞生长因子23(FGF23)的共受体,在肾脏中参与调解机体钙磷代谢与活化维生素D的合成,而分泌型作为一种体液因子,可以在血液、尿液以及脑脊液中被检测到,发挥多种生物学功能[1]。研究发现在胃癌组织中klotho蛋白的表达较正常组织降低[2]。且在人结肠直肠癌[3]和胰腺癌[4]组织上亦表达降低。表明klotho蛋白的表达水平与肿瘤发生相关,本研究拟检测胸水标本klotho蛋白水平,初步探讨klotho蛋白是否可以作为鉴别良恶性胸腔积液的一种生物标记物。
1 对象和方法
1.1 对象
收集2016年8月至2017年8月我科住院的胸腔积液原因待查患者的基本信息,收集胸水标本,分为良性胸腔积液组(共33例,包括漏出液10例、结核性胸腔积液13例、肺炎旁胸腔积液10例),恶性胸腔积液组(21例),其中漏出液的标准是根据light三标准即胸水总蛋白/血清总蛋白>0.5,胸水乳酸脱氢酶值/血清乳酸脱氢酶比值>0.6,胸水乳酸脱氢酶值>血清乳酸脱氢酶数正常值上限的2/3,上述三条都不符合诊断漏出液;结核性胸腔积液判定标准为:根据《中国结核病防治规划实施工作指南(2008 版)》,确诊结核性胸膜炎,或临床诊断结核性胸膜炎,经抗结核治疗有效;肺炎旁胸腔积液判定标准:胸水常规以中性粒细胞为主,抗感染治疗有效,并能除外结核和肿瘤;恶性胸腔积液判定标准:胸水病理细胞学见明确恶性依据。四组在性别组成及年龄上具有可比性,四组患者均无肾功能异常。(见表一)
1.2 方法
收集患者性别、年龄等基本信息,收集无肝素抗凝胸水标本2ml,1500转/min离心15分钟,吸取上清液-80℃冰箱保存,后采用ELISA方法检测胸水标本klotho蛋白含量。
1.3 统计学方法
统计数据采用均数±标准差(Mean±SD),应用SPSS 16.0统计软件对数据进行单因素方差分析和直线相关分析(Pearson分布)、相关系数显著性检验。P<0.05为差别有统计学意义。
2 结果
2.1 良性胸腔积液和恶性胸腔积液klotho蛋白表达水平的差异
同良性胸腔积液组相比,恶性胸腔积液组 klotho蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义,表明klotho蛋白可以作为鉴别良恶性胸腔积液的生物标记物。(见表一)
2.2 胸腔积液klotho蛋白表达水平与年龄、外周血/胸水CEA、尿素氮及肌酐的相关性分析
结果表明:胸腔积液klotho蛋白表达与年龄、外周血/胸水CEA、尿素氮及肌酐之间均无相关性,差异无统计学意义,表明胸水klotho蛋白水平可以不受年龄及肾功能的影响。