芫荽，别名胡荽、香菜、香荽。一般人都认为香菜根的功效与作用没有什么，经常丢弃香菜根，忽视香菜根的功效与作用，其实香菜根的功效与作用不仅有，而且香菜根的功效与作用还能够治疗很多疾病，香菜根的功效与作用表现为：去腥、健脾胃、治疗荨麻疹、促消化、促进血液循环、治乳痈初起、治感冒、治胃寒痛症等[1]。芫荽全株植物皆可食用，但一般日常只吃叶与茎，将根部丢弃，得不到充分人利用，主要原因是人们对芫荽根部的了解甚少。本实验不仅是对香菜的未来发展提供依据，对容易被忽略的根部的发展提供更多的证明。
近年来，随着对芫荽研究的深入，芫荽已提取出多种成分和研究其作用，研究发现，芫荽中花青素的含量高于柿叶与花生壳。目前，香菜中黄酮类化合物的提取研究不少，但香菜根中花青素的提取及含量测定研究不多[2]。本研究以芫菜根为原料，采用微波辅助提取芫荽根中花青素，利用响应面法（RSM）考察乙醇浓度、料液比、温度、时间等因素对芫荽根中花青素含量的影响，并确定最佳提取条件，以高效液相色谱（HPLC）测定其含量为验证。为进一步开发和利用香菜资源提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1仪器 高效液相色谱仪 LC-20AT 日本岛津公司；紫外-可见检测器 SPD-20A 日本岛津公司；超声波清洗机 TP150 天鹏电子新技术（北京）有限公司；真空泵(无油) GM-0.33II 天津市津腾实验设备有限公司；电子分析天平 MEL-204E 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；溶剂过滤器 1000 mL 天津市津腾实验设备有限公司；多功能食品粉碎机HL-28 上海海菱电器有限公司；微波提取器WTS03-1南京杰全设备公司。
1.1.2试剂 甲醇、甲酸 HPLC 级 国药(集团)化学试剂有限公司；乙醇 分析纯；水 纯净水 杭州娃哈哈集团；芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所。
1.2 试验方法
1.2.1 原材料的处理 新鲜香菜购于农贸市场，将芫荽根剪下，用流水清洗并凉干，放入烘箱中烘干至恒重，粉碎磨粉过筛（60目），将芫荽根样品放入磨口广口瓶中，置于干燥器里保存，备用。
1.2.2 原材料中黄酮类化合物的提取 称取100g芫荽根粉，置于微波萃取器中，在50 ℃时，按1:20的料液比加入60%乙醇溶剂，通电，微波萃取25 min，取出，冷却室温后，取澄清滤液，用 0.45µm针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于 100 mL 容量瓶中，备用[2]。
1.2.3对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的芦丁标准品10 mg，置于100 mL 容量瓶中，用无水乙醇定容，配成0.1 mg / mL的芦丁对照品溶液，摇匀，取澄清滤液，用 0.45µm 针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于 10 mL 容量瓶中，备用。
1.2.4色谱条件 色谱柱：Shmadzu Shim-pack-vp-ODS（150 mm×4.6 mm，5 µm）；柱温：室温；流动相:甲醇(0.02mol/L )-甲酸(95:5)，流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL。
1.2.5 流动相的选择 在色谱条件的优化中，在流动相的选择上，分别考察了甲醇-水、甲醇-甲酸两种流动相。经过试验：甲醇-甲酸按体积比为95:5作为流动相，峰形最理想。流动相中，甲酸的加入，使花青素在流动相中的电离减弱，从而减少了峰的拖尾可以改善分离度和减少了峰的拖尾，并提早出峰时间，但对保持柱的稳定性和延长柱的寿命有一定的影响[3-4]。
1.2.6 标准曲线的绘制 准确移取0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL芦丁标准液于10 mL 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，进行HPLC分析。以峰面积为横坐标，芦丁含量为纵坐标给图，制得标准曲线，计算出标准曲线的回归方程为: A=1.598×107C +1.168×104，R2=0.9998。如图1所示。结果表明，该方法分离效果良好，质量浓度在0.01～0.047 mg/mL 时与峰面积呈良好的线性关系。