唾液酸酶,又叫神经氨酸酶,为糖苷水解酶,主要水解寡糖、糖蛋白、糖脂和多聚乙酰神经氨酸等唾液酸末端的a-(2,3)、a-(2,6)和a-(2,8)糖苷键,并调节细胞的多种功能,比如细胞信号转导和黏附等[1]。其广泛分布于生物界中,目前已发现4种哺乳动物唾液酸酶,它们分别是神经氨酸酶1(NEU1)、神经氨酸酶2(NEU2)、神经氨酸酶3(NEU3)和神经氨酸酶4(NEU4)。唾液酸酶在生理病理过程中均具有重要作用,研究提示唾液酸酶,可能参与了细胞的增殖分化、细胞凋亡、侵袭转移等过程[2-3]。但4种唾液酸酶的含量、分布和对细胞的影响却不尽相同[4] 。因而受到广泛关注,近年对其研究发展迅速。本文就其对宫颈细胞的影响进行较大样本研究,现报道如下。
1.资料与方法
1.1 临床资料 我院自2013 年7 月至2018 年5月患者宫颈分泌物检查唾液酸酶阳性的全部患者997例,其中滴虫感染328例、加德纳氏菌感染361例、Hpv感染308例,平均年龄33.1岁,均为已婚,3例未育,19 例有手术史者。滴虫感染328例、加德纳氏菌感染361例、Hpv感染308例全部行阴道镜检查。依据感染的不同,分为相应的3组。
1.2 方法
1.2.1 检验科检查方法 BV试剂检测唾液酸酶活性;滴虫及加德纳氏菌均为显微镜下查见阳性,人类乳头瘤病毒(HPV)IgM检测试剂盒(胶体金法)由深圳迈瑞科技有限公司提供。
妇产科检查方法:阴道镜检查宫颈形态变化;
1.2.2 检查设备 检验科:细菌性阴道病联合测定试剂盒(BV) 化学反应法 珠海丽珠股份有限公司生产,原理是当试剂与样本中的唾液酸酶接触时,底物被水解,产生发色基团和新生态氧,发色基团进一步被空气中的氧或新生态氧氧化变成蓝色。在规定的反应时间后,立即读取试验结果。如果唾液酸酶检测孔变成蓝色为BV阳性,不变色为BV阴性。显微镜(OLYMPUS CX31 上海普赫光电科技有限公司)。人类乳头瘤病毒(HPV)IgM检测试剂盒(胶体金法)由深圳迈瑞科技有限公司提供。电子恒温水浴箱为北京中兴伟业公司提供。
妇产科阴道镜:北京冠邦科技有限公司。
1.2.3 样本要求 用无菌棉拭子收集女性阴道壁(阴道下部三分之一处)尽可能多的分泌物样本。
1.2.4 检验方法和结果
1.2.4.1 取出检测液及所需数量的反应板,平衡至室温。
1.2.4.2在样本抽提管中滴加约400ul滴样本抽提液,现将采样拭子浸入到滴有抽提液的样本抽提 管中,反复搅动挤压5-6次,挤干液体后,弃去拭子。
1.2.4.3用配套的微量吸管向对照孔和反应孔中各滴加一滴抽提好的样本液。
1.2.4.4在检测孔中再滴加一滴唾液酸酶检测试剂,轻拍混匀。置37℃隔水恒温箱中温育15分钟,观察各反应孔的颜色变化。变蓝为唾液酸酶阳性,不变色为唾液酸酶阴性。
1.3 观察随访 包括滴虫感染328例、加德纳氏菌感染361例、Hpv感染308例的唾液酸酶活性检测。全部阴道镜下行宫颈形态检查,随访1个月。
1.4 统计学处理 实验数据用±s表示,采用SPSS16.0软件,采用t 检验,P < 0.05 认为有统计学意义。