骨质疏松是老年人常见的慢性生 活方式疾病 ;随着人们寿命的延长 ,社会的老龄化, 其 发病率明显上升 ;且它们的致残率 、致死率都很高, 给 患者及其家庭和社会带来沉重的负担 。骨骼系统和免疫系统存在相互调节作用,二者共享许多调节分子:细胞因子及其受体、信号分子和转录因子[1]。正常的骨再建过程依赖于骨吸收和骨形成过程的动态平衡,该动态平衡受免疫系统的调控,尤其是免疫系统被激活或处于病理状态时[2]。目前关于骨质疏松和T淋巴细胞亚群的临床研究还较少, 本研究旨在了解老年骨质疏松患者T淋巴细胞亚群的变化,试图初 步探讨老年骨质疏松与T淋巴细胞亚群变化的关系。
1.资料与方法
1.1一般资料 选取2018年1月至2018年5月在我院住院的老年患者89例,年龄在60-90岁。排除标准:(1)服用干扰骨代谢药物者(2)患有影响T细胞免疫的疾病,如肿瘤、再生障碍性贫血、粒细胞减少症、过敏性皮炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、膜性肾小球肾炎,胰岛素依赖性糖尿病、乙型肝炎急性/慢性,自身溶血性贫血、上呼吸道感染、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、结核病、疟疾、获得性免疫缺陷综合症。
1.2方法:
1.2.1骨密度仪测定骨密度值:采用法国MEDI公司MEDIX90骨密度仪,测量每例患者的双侧髋关节和腰椎的BMD值,根据WHO规定,将T值<-2作为骨质疏松组,T值-2~-1作为骨量减少组,T值>-1作为正常骨量组根据患者BMD结果将所有患者分为3组:骨质疏松组29 例,年龄平均(84.59±8.02) 岁,骨量减少组26 例,年龄平均(83.62±8.28) 岁,骨量正常组34 例,年龄平均(84.67±8.23) 岁。各组年龄差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2.2 流式细胞仪监测T淋巴细胞亚群:(1)试剂:BD MultiteestCD3/CD8/CD45/CD4试剂,包含FITC标记的CD3抗体、PE标记的CD8抗体、PerCP标记的CD45抗体;BD MultitestCD3/CD16+56/CD45/CD19试剂,包含:FITC标记的CD3抗体、PE标记CD16+CD56抗体、PerCP标记的CD45抗体、APC标记CD19抗体;流式细胞仪BD FACSCantoⅡ美国BD公司。⑵流式细胞术测定T细胞亚群:采用EDTA抗凝人外周血2ml,采血后来回颠倒7-8次。分别取专用流式管2支,第一管加入BD MultiteestCD3/CD8/CD45/CD4试剂20ul,50ulEDTA抗凝全血;第二管加入BD MultiteestCD3/CD16+56/CD45/CD19试剂20ul, 50ulEDTA抗凝全血(加样均直接加入底部,不能沾到管壁);震荡后避光室温放置15分钟;再加入1:10稀释Lysing Solution 450ul; 震荡后避光室温放置15分钟,红细胞充分裂解后即可上机。用BD canto软件分析数据用于报告。
1.3 观察指标 观察各组T细胞亚群CD3%、CD3+CD8+%,CD3+CD4%,CD4/CD8,水平。
1.4 统计学方法 采用SPSS20统计软件进行数据处理,计量资料以均数±标准差(±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,组间两两分析采用LSD-T检验;以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
T淋巴细胞是指CD3+占总的淋巴细胞的比率;T辅助淋巴细胞为CD3+CD4+,占CD3+淋巴细胞的百分比;T抑制 /毒性淋巴细胞 (CD3+CD8+),占CD3+淋巴细胞的百分比,T辅助细胞/T抑制细胞比值(CD4/CD8)。