介类(Testacean)中药,从其来源及入药部位来看,大多为类动物的壳、甲,其中以贝类壳居多。随着《本草纲目》明确提出介类中药之后,后世医家在多种介类中药临床应用的基础上提出了“介类潜阳”概念,目前临床常用介类中药以牡蛎、石决明、瓦楞子等为主[1]。所谓“介类潜阳”是对该类中药具有平肝潜阳功效,能够治疗肝阳上亢证的精炼概括,属于中药药性理论范畴[2]。传统中医理论认为牡蛎、石决明、瓦楞子三种介类中药经煅制后药效学发生一定变化,三种介类中药煅制后咸寒之性降低,具有收敛固涩、制酸止痛的功效,用于胃痛泛酸等[3]。目前未有报道牡蛎、石决明、瓦楞子三种介类中药煅品是否具有平肝潜阳作用,本实验结合现代药理研究平肝潜阳作用的实验方法,参考肝阳上亢型高血压的主要观察指标,对牡蛎、石决明、瓦楞子三种介类中药前后进行了药效学试验研究。
1. 实验材料
1.1 药材
牡蛎生品(批号:160901,产地:浙江),石决明生品(批号:160401,产地:广东),均购于浙江中医药大学中药饮片厂。瓦楞子生品(批号:20160601,产地:浙江),购于浙江百草中药饮片有限公司。药材经浙江中医药大学药学院宋捷民教授鉴定:牡蛎为牡蛎科动物近江牡蛎(Ostrea rivularis Gould)的贝壳;石决明为鲍科动物杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)的贝壳;瓦楞子为蚶科动物毛蚶(Arca subcrenata Lischke)的贝壳。
1.2 试剂
卡托普利片(25mg,1605107B,浙江得恩制药有限公司);肝素钠(20160208,深圳华盛昌机械实业有限公司);NO ELISA试剂盒(20170109,南京建成生物工程研究所);NE ELISA试剂盒(LOT201612,上海信帆生物科技有限公司);E ELISA试剂盒 (LOT201612,上海信帆生物科技有限公司);AngⅡ ELISA试剂盒(LOT201612,上海信帆生物科技有限公司 )。
1.3 动物
SPF级Wistar- Kyoto(WKY)大鼠8只(雄性,3个月龄),体重:190~215g,由浙江中医药大学动物实验中心提供。SPF级自发性高血压大鼠(SHR)64只(雄性,3个月龄),体重180~200g,北京维通利华实验动物技术有限公司,动物许可证号SCXK(京)2016-0011。
1.4 仪器设备
BSA124S-CW分析天平 :北京赛多利斯科学仪器有限公司;DT-8806 H红外线测温仪:深圳华盛昌机械实业有限公司;ALC-NIBP无创血压测量分析系统:上海奥尔科特生物科技有限公司;HC-3018高速离心机:安徽中科中佳科学仪器有限公司;恒温水浴锅:上海森信实验仪器有限公司;MK3型酶标仪:赛默飞世尔上海仪器有限公司;移液枪:德国Brand公司。
2. 实验方法
2.1 煅品制备
将牡蛎、石决明、瓦楞子生品分别洗净、晒干,按照2015版《中国药典》炮制通则项下明煅法,将三者生品分别砸成小块,置于马弗炉中明煅(500℃,30min)至灰白无光泽、质酥脆,取出、冷却后取得三者煅品。