花粉是植物生命的精华，既包含生命的遗传信息，又有孕育生命的全部营养成分，具有很高的营养价值和药用价值[1]。近年来，有研究表明花粉含有多种生物活性物质，在抗肿瘤、降血脂、抗炎、抗氧化等方面都有一定的作用[2]。
牡丹花形大，花粉量多，根据牡丹栽植面积花粉年产量可达上千吨[3]； 牡丹花粉中富含氨基酸、蛋白质、多种维生素、黄酮和矿物元素等营养成分，目前以牡丹花粉为原料的特色食品已有初步研究，如牡丹花粉啤酒、牡丹花粉保健面条、牡丹花粉酸奶等的研制[4-6]。研究者对牡丹花粉的研究多集中在花粉形态、萌发及活力的研究[7-9]，在牡丹花粉的抗氧化作用和美白功效方面的研究鲜见报道。本研究以洛阳牡丹花粉为研究对象，采用不同体积分数的乙醇进行加热搅拌提取，测定提取液中黄酮的含量，通过典型的抗氧化体系揭示不同质量浓度花粉提取液的抗氧化活性，同时测定提取液对酪氨酸酶的抑制率体现花粉提取液的美白效果，旨在为牡丹花粉产业及其在化妆品、生物抗氧化剂的开发利用提供一定的参考。
1 材料和方法
1.1 材料来源与处理
牡丹花粉于2010年4月采自洛阳国际牡丹园，置于烘箱内30 ℃烘干，过筛孔内径为420 µm的金属筛，置入棕色广口瓶中低温保存备用。
1.2 方法
1.2.1花粉提取液的制备
准确称取牡丹花粉0.40 g，置50 mL小烧杯中，分别加入不同体积分数的乙醇溶液（30%乙醇、70%乙醇、95%乙醇）10 mL，密封提取体系，在磁力搅拌器上60 ℃搅拌30 min，将提取液转移至离心管中，4000 r/min离心15 min，取上清液至25 mL容量瓶中，重复提取操作一次，合并上清液再用乙醇溶液定容至25 mL，备用。
1.2.2花粉提取液中黄酮含量的测定
采用AlCl3显色法测定提取液中黄酮含量[10]。以芦丁标准品制作标准曲线，得标准曲线方程为C（g/L）=0.2431 A420（R2＝0.9983）。将花粉提取液稀释一定倍数后加入反应体系中，测定420 nm的吸收值，通过标准曲线经计算可得黄酮含量。
1.2.3花粉提取液抗氧化能力的测定
将牡丹花粉提取液稀释为3个质量浓度梯度（0.2 g/L、0.4 g/L及0.8 g/L），采用DPPH法、水杨酸法[10]测定各花粉提取液对DPPH自由基和·OH的清除率。
1.2.4花粉提取液美白效果的测定
将高瑞英[11]等的方法略加改动来测定不同质量浓度牡丹花粉提取液对酪氨酸酶活性的抑制作用，比较分析不同浓度、不同溶剂类型的牡丹花粉提取液的美白效果。
取1 mL花粉提取液，加入0.8 mL PBS及1 mL酪氨酸溶液于试管中，混合后于37℃下预热10 min，再加入0.2 mL酪氨酸酶溶液，混匀后37℃下反应25 min，于475 nm处测定吸光值。根据公式得提取液对酪氨酸酶的抑制率：
抑制率（%）=[(A－A0)－(B－B0)]/( A－A0)×100
其中，A：以等体积乙醇代替提取液测得的吸光值；A0：以等体积乙醇取代提取液，以等体积PBS取代酪氨酸酶溶液测得的吸光值；B：反应体系中加入提取液测得的吸光值；B0：以等体积PBS取代酪氨酸酶溶液测得的吸光度值。