1建立在自由基学说基础上的研究
年龄增长和疾病等原因可破坏机体自由基平衡,造成自由基过剩。过剩自由基可引起脂质过氧化反应并产生脂质过氧化产物,进而攻击细胞膜及核酸、蛋白质和酶类等生物大分子,使其变性最终导致细胞功能严重受损以致衰老、死亡。欧阳昌汉等观察白藜芦醇抗衰老时,证实白藜芦醇可使衰老小鼠脑组织和血清中SOD(超氧化物歧化酶)及GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)活性不同程度升高, NO(一氧化氮)、MDA不同程度下降,脑组织中LF(乳铁蛋白)降低,认为白藜芦醇通过清除氧自由基及抗脂质过氧化而延缓衰老。许爱霞等在研究党参多糖延缓衰老机制时,证实党参多糖可以使衰老模型组小鼠血清及肝组织中SOD活性上升和MDA含量下降,脑组织中LF下降,肾组织中GSH-Px活力及NOS(一氧化氮酶)活性升高,从而表明党参多糖延缓衰老与清除自由基及抗脂质过氧化有关。张耀峰等和丁玉琴等均研究证实旱莲草、女贞子都可提高衰老小鼠脑组织SOD和GSH-Px的活性,降低MDA含量,说明其是通过提高脑组织抗氧化能力来延缓衰老。海力茜等研究新疆红芪可通过增强机体清除自由基的能力,提高机体的抗氧化酶活性,发挥抗衰老的作用。杨小虎等在研究黄芪水提液清除体外自由基作用时,表明黄芪水提液具有明显清除MDA,升高SOD的作用,能够提高机体抗氧化能力,从而起到抗衰老能力。不仅单味中药具有延缓衰老的作用,中药复方也有明显延缓衰老的作用。王新玲等通过多年临床研究表明金匮肾气丸可使肾虚患者血液中的SOD和GSH-Px含量升高,MDA含量降低,明显改善肾虚症状,有延缓衰老的作用。刘梅等研究证实右归饮可升高衰老大鼠脑组织SOD、降低MDA,补气健脾的四君子汤可降低衰老大鼠脑组织中NO、NOS,说明补肾健脾通过抗脂质过氧化达到延缓衰老的作用。王淑梅等研究二至丸可以提高亚急性衰老小鼠心、脑、肾组织中的SOD、GSH-Px酶活性,降低MDA酶的活性,且呈剂量依赖关系,表明补益肝肾的二至丸可能通过调节自由基代谢来延缓衰老。陈景华等研究证实滋阴补肾的归肾丸(熟地、山药、枸杞子、山茱萸、茯苓、当归、杜仲、菟丝子)可使大鼠肝脏及脑组织中SOD活力升高、MDA含量降低,表明中药复方归肾丸具有清除自由基、抗氧化延缓衰老的功效。可见中药及其复方具有促进机体衰老时清除自由基酶的能力,增强了机体抗氧化能力,从而达到延缓衰老的目的。
2 建立在免疫学说基础上的研究
《内经》云:“正气存内,邪不可干;邪之所凑,其气必虚”。现代医学认为免疫功能低下是各种疾病发生发展的基础,也是促进机体衰老的重要因素。随着年龄的增长,免疫器官逐渐老化,免疫细胞数量减少和功能降低,则感染性疾病、癌症等发病率和死亡率逐渐增高。郑振等研究补肾活血方(淫羊藿、山萸肉、补骨脂、鹿角等)抗衰老作用机制时,着重于对T细胞凋亡相关基因Fas、FasL基因的影响,证实补肾活血对FasL基因的转录具有负调控作用,可下调老年大鼠T细胞的过度凋亡抗衰老。沈自尹等通过研究证实枸杞多糖能有效降低老年大鼠T细胞的过度凋亡,而且能够下调促凋亡肿瘤坏死因子受体(TNFR1)基因mRNA表达,并上调抗凋亡Bcl2基因mRNA表达,能够改善老年大鼠T细胞过度凋亡的状态。刘小雨等研究证明淫羊藿总黄酮可以抑制淋巴细胞过度凋亡,校正老龄大鼠Th1、Th2、Th3类细胞因子之间的比例失衡,认为黄酮是抗衰老的活性成分,也是一种有效的免疫增强剂,在体液免疫和细胞免疫调节中具有重要作用。
3.建立在端粒学说基础上的研究
细胞每进行一次分裂会丢失50~ 200bP端粒,当端粒缩短到一定程度时细胞就无法继续分裂,DNA复制也无法正常进行,即表现为衰老、死亡。杨善民等在臭氧(O3)衰老模型上采用端粒重复序列分析(TRAP)检测小鼠胸腺组织端粒酶活性,证明李永康膏滋(桑椹子、薏苡仁、枸杞子等)能使衰老小鼠游泳、爬绳和抗冻能力增强,并能增强衰老小鼠胸腺端粒酶活性,从而延缓端粒酶的缩短,进而延缓衰老。黄精具有补肾调经、补肾生血的功效,李永元等研究证实衰老动物通过黄精煎剂治疗后其脑、性腺组织中端粒酶活性明显增高,但MDA含量变化轻微,这间接说明黄精煎剂能提高衰老动物脑和性腺组织的端粒酶活性,发挥抗衰老作用。沈自尹研究证实衰老细胞用淫羊藿总黄酮后,其端粒长度与老年组比较明显延长,可见淫羊藿总黄酮能延缓衰老细胞端粒长度的缩短,这可能是其抗衰老的机制。赵立新培养人胚肺衰老型成纤维细胞,用TRAP-ELISA法检测松花粉处理前后细胞端粒酶活性的变化,证实松花粉干预后能显著促进细胞生长水平、下降衰老型成纤维细胞数量、上升端粒酶活性,说明松花粉可能是通过激活端粒酶活性来延缓衰老的。
4建立在DNA损伤修复学说上的研究
不断积累损伤使得DNA损伤修复能力下降,引起基因及其表达异常,产生各种疾病和变异现象,最终引起生物衰老。王正引等[30]给老年小鼠灌服4个月补肾健脾养血活血方(枸杞子、制首乌、淫羊藿、女贞子、当归、菟丝子、黄芪、黄精等),然后采用光密度扫描和聚合酶链反应技术检测正常组和补肾健脾养血活血方组mtDNA(线粒体DNA)的缺失突变情况,结果表明补肾健脾养血活血方可以抑制老年小鼠mtDNA的缺失突变,提示补肾健脾养血活血方延缓衰老的机制是保护mtDNA、减少mtDNA的氧化损伤。陈刚等观察脾肾双补法(党参、白术、茯苓、山药、熟地、山萸肉、淫羊藿、巴戟天等)对衰老小鼠胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响,结论表明脾肾双补法可以缩短衰老小鼠胸腺细胞彗星拖尾长度,具有一定的拮抗或修复DNA氧化损伤的作用且具有量效关系,说明补脾益肾能拮抗或修复DNA氧化损伤起到延缓衰老的作用。李海权等研究证实独活及其醇提物可提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活性,减少自然衰老小鼠脑组织的mtDNA缺失,表明独活及其醇提物对自然衰老小鼠线粒体DNA的氧化损伤有良好保护作用。